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ELISA試劑盒實驗的清潔十分重要

更新時間:2019-08-19      點擊次數(shù):1160
       ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。
  ELISA試劑盒實驗清潔方面應(yīng)注意的事項:
  1.洗板
 ?、俦WC洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(選擇潔凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
  ②合理安排,或多用幾臺洗板機。
  2.讀板
  應(yīng)保證酶標板清潔,在整個操作過程中保證酶標板不觸摸次氯酸;盡可能完結(jié)ELISA檢測標準自動化,有用前進檢測質(zhì)量。
  3.加樣
 ?、贅吮緸檠澹簩⒀合忍烊患拇?-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:有必要運用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后有必要當即倒置采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
 ?、诩訕雍蠹皶r放入孵箱。
 ?、奂用冈噭┖笥梦堅诿笜税灞砻孑p拭吸干。
  ④如果選用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
  ⑤標本較多時,請分批操作。

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